どのように艱難からサポニンを抽出するには?

Tribulus terrestris, also known as tribulus, hard tribulus, or white tribulus。 Bitter, pungent, warm in nature, slightly toxic, enters the liver channel. Used to treat headache and dizziness, wind rash and itching, chest and hypochondrium distending pain, breast obstruction and mastitis, red eyes and eye obstruction, consumptive-thirst, etc. 1]. Studies have confirmed that Tribulus terrestris extract, especially tribulus terrestris saponins, has pharmacological effects such as improving cardiovascular health, enhancing sexual function, lowering blood lipids, lowering blood sugar, anti-aging, and anti-tumor [2].

今後の利用と研究の基盤となるのは、これらの有効成分の抽出と分析です。この記事では、total tribulus saponinsの抽出方法と、内容物の分析と試験方法について説明します。異なる抽出法を比較し、それぞれの長所と短所を分析することで、今後の研究の基盤を提供する。

全サポニンのための1抽出法tribulus terrestris

文献報告書[4-8]によると、テンポラリスの全サポニンの抽出法は、主に溶媒抽出法である。溶媒抽出法は、従来の溶媒抽出法[145]、マイクロ波抽出法[67]、超音波抽出法[8]に要約できる(マイクロ波抽出法と超音波抽出法は、現代の溶媒抽出法に分類できる)。ここでは、上記の3つの方法に従って説明する。

1.1従来の溶媒抽出法

The solvent extraction method is based on the principle of like dissolves like, and the chemical components are extracted from the raw material by selecting an appropriate solvent. Saponins are generally soluble in water, methanol and dilute ethanol, easily soluble in hot water, hot methanol and hot ethanol, and insoluble in ether, chloroform and benzene. Among them, ethanol and water are often used to extract saponins. There are many traditional methods for extracting saponins, such as the maceration method, the decoction method, and the reflux extraction method. The alcohol precipitation method using water as the solvent is generally used to 完全なサポニンを抽出する. The method uses water as a solvent, reflux extraction, filtration and concentration to obtain the extract. Then, ethanol of different concentration gradients is added to the extract. Usually, when the alcohol content is 40% to 80%, components such as starch, polysaccharides, dextrin, amino acid gum mucilage, and protein can be removed, and the saponin remains in the filtrate [3]. There are also alcohol extraction methods, such as the alcohol extraction column method and the alcohol extraction concentration method.

Wang Xiaoyang et al. 14 used the alcohol extraction column method, with ethanol as the solvent for reflux extraction. In the orthogonal test method for the preferred extraction process of tribulus terrestris saponins, three methods were used, of which the alcohol extraction column method was refluxed with 70% ethanol for 3 times, 2h each time, treated with macroporous adsorption resin, concentrated and dried to obtain the product. The results showed that the content of saponin in the dried Tribulus terrestris extract was 43.23%, and the extraction rate was 80.31%. Cao Zhenyan et al. [5 used an orthogonal experiment with an alcohol concentration method to determine that the best process for extracting tribulus saponins is to reflux 75% ethanol three times for 1 hour each time. The result was a total saponin content of 52. 19%. Both methods have a high extraction rate, but generally have more impurities and can be used for industrial production. In short, the traditional solvent extraction method is generally used to extract total tribulus saponins because of its advantages of being simple to operate and low cost. However, it also has some disadvantages, such as a long extraction time and low safety.

1.2マイクロ波抽出法

マイクロ波による抽出は、マイクロ波を利用して物質を抽出する新たに開発された抽出法である。マイクロ波は溶媒中に放射され、細胞壁を通過して細胞内部に到達する。極性溶媒と細胞液はマイクロ波エネルギーを吸収するため、セルの内外の温度が上昇し、蒸発圧が上昇する。圧力が細胞壁の耐力を超えると細胞壁が破裂し、細胞内にある有効成分が細胞外に放出されて溶媒に運ばれます。

この技術は、天然物の抽出に適しており、高効率、高速、選択性の要件を制限なく満たすことができます。liら[6]は直交法を用いてエウポールの抽出条件を最適化した。最適なプロセス条件は、試料体積0.18 - 1.15 mm、抽出時間5分、マイクロ波出力500 w、固液比1:20 (g・ml -¹)、測定されたステロール含有量91.3%であった。したがって、マイクロ波を利用した抽出は、従来の方法よりも高速で効率的であり、加熱が均一で、溶媒が節約され、プロセスが簡単で、適用範囲が広いという利点があります。しかし、理論的にも応用的にも限界があります。現在、マイクロ波抽出技術と設備は工業生産にほとんど使用されておらず、さらに推進する必要があります[7]。

1.3超音波抽出法

超音波は、高速で強力なキャビテーション効果と攪拌作用を発生させ、薬中の細胞を破壊し、溶媒を細胞内に浸透させ、薬中の有効成分の溶媒溶解を加速させます。この技術は、天然の薬剤成分の抽出に近年広く応用されている。サポニンの抽出では、アグリコン構造の破壊を避けることができる。超音波抽出は、従来の方法と比較して、抽出時間と抽出速度に明らかな利点があります。この技術は、多くの研究にも使用されていますextract total tribulus saponins。zhang juhongら[8]は、希釈エタノールを溶媒とした超音波抽出法を30分間用いて、テンポニンの全含有量を測定した。その後、マクロポーラス吸着樹脂で精製しました。最初のデータでは、全サポニンの最大含有量は2.8%であった。この方法は抽出時間を短縮し、抽出速度を向上させるだけでなく、超音波抽出により有効成分の構造が変化しないことを保証します。したがって、超音波補助抽出法は一般的に使用される溶媒抽出法の1つである。

以上の3つの抽出法を比較分析することで、それぞれの長所と短所が明らかになり、全サポニンを有効に抽出するための参考となる。表参照1。

図2患部からの全サポニンの分析・試験法

全サポニンを分析する一般的な方法としては、紫外・可視分光法[10-13]、高性能液体クロマトグラフィー[14.5]、キャピラリー電気泳動[161]などがある。また、このペーパーチップ法は、テントウサポニンの定量への応用も期待されます。

2.1 Ultraviolet-visible観察し

紫外線分光法が最も一般的な手法であるサポニンの全ての成分を含む。この方法では、色のある物質だけでなく、共役構造を持つ無色の物質も正確に測定できます[9]。李岩ら[10 monomericを使って■サポニン成分Tribulus terrestris物質参考として,試薬の色試薬はEを受けて、硫酸の答えをあるエタノール、判定波長は520 nmとその結果良好な線形関係を長く基準金額の間の実体とabsorbance値範囲0.06-0.2 mg。li ying et al。それぞれの果実の品質の違いを比較する際に、uv-vis分光光度計を用いて果実のサポニン含有量を測定した。参照物質としてジオゲニンを使用し、hcio: vanillin(5%)を4:1として使用して色の発生源の選択を調査した。その結果、diosgeninは良好な線形性関係の範囲7.52-150.4μg安定は浓い回収率が高いだ。

zhang pingら[12]は、紫外線分光測光法を用いて、異なる起源のサポニン含有量を求めた。Tribulus terrestrisは実体制御(使用され、その結果、線形関係は良くやって範囲7.52-150.4μg。張Sujunら。[13基準の実体とdiosminと紫外線観察し使用検出光の波長の310 nm及び色開発者のHCIO₄にコンテンツサポニンの総排出量を一定にすべく実や茎も葉Tribulus terrestris異なる収穫回、結果を比较する幕政に参与した。その結果,7月の茎と葉のサポニン含有量は果実のサポニン含有量に比べて有意に高く,茎と葉のサポニン含有量は最も高かった。つまり、紫外分光法は他の分光法と比較して装置や操作が簡単で、コストが安く、分析速度が速く、感度が高いという利点があるため、サポニン分析によく用いられます。

2.2高性能液体クロマトグラフィー

With the popularization of high-performance liquid chromatography, more and more saponin components are detected using this method. High-performance liquid chromatography uses a liquid as the mobile phase, and a high-pressure infusion pump is used to transport a single or mixed solvent, buffer, or other mobile phase, causing the sample to be tested to move, so that the components are separated. A highly sensitive detector converts this into a detectable signal, enabling qualitative and quantitative analysis. Among them, the detector needs to be determined by the laboratory conditions and the properties of the saponin itself. For some saponins such as diosgenin, which do not have characteristic ultraviolet absorption and cannot be detected using an ultraviolet detector, a light scattering detector should be used. Li Haoyue et al. 114 used HPLC combined with colorimetry to control the quality of Tribulus terrestris. The Welch Ultimate LP-Ci 移動相はメタノール:水(80:20)で8カラムを用いた。患難菌サポニンは患難菌サポニンを指標として検出され、研究された。でいずれもその結果HPLC方、測方法、Tribulus■サポニンは線形0.820関係がよい7.380μgや24.600 86.100μg 99.5%に99.3%平均回収率と。この方法の特徴は、簡単で簡単、高速、高分離効率、高感度、正確な測定結果であることです。それは患難の内容の決定に適しています。

2.3毛細血管電気泳動

キャピラリー電気泳動は、イオンや核粒子を高電圧の電場によって駆動し、キャピラリー内で分離する液体クロマトグラフィー技術である。その中でも、高効率のキャピラリー電気泳動が広く使用されています。分析の医薬研究自然薬かの原ハーブの分析やが医薬品终え、独特の分離と分析で优位にある程度の進展はあった分離と質的な決定汉方薬の有効成分や自然の薬品なども所蔵[161。ce技術の普及に伴い、実験コスト、分離効率、分離速度、微小定量化および適応性の点でhplcよりも優れています。分析効率が高く、注入量が少なく、操作が簡単で、分析コストが低く、キャピラリーカラムが汚染されにくいというメリットがあります。[171。この方法は、天然薬の有効成分の分離と含有量の決定に広く使用されています。しかし、キャピラリ電気泳動を用いて全サポニンを検出した報告は多くない。

2.4ペーパーチップ決定方法

Paper chip microfluidic technology is a new type of microfluidic technology that is widely used in medical diagnosis, food safety testing, environmental monitoring and other fields due to its simple and fast processing, ease of use, and low cost. The basic principle is to form channels on the paper surface to guide the fluid I18]. Among them, forming channels on filter paper with hydrophobic materials is currently the most commonly used method, that is, drawing a hydrophilic-hydrophobic contrast map on the paper to create micron-scale capillary channels on the paper [19]. Solutions can be driven to specific areas by capillary force, so no external equipment is required. The commonly used detection methods mainly include photometric detection [201, fluorescence, electrochemiluminescence, and electrochemical detection methods, among which photometric detection is the most intuitive and commonly used method.

Wu Jian et al. [2 used a paper chip to detect the effective ingredient phloretin in Fructus Gardeniae and achieved satisfactory results. Hao Zhenxia et al. 1221 used a microfluidic paper chip to rapidly detect the content of tea polyphenols in order to eliminate the difference in color development time during the test. Using this method, different diluted tea samples were rapidly tested within 3 minutes of the start of the color development reaction, and the results obtained were in good agreement with the conventional method. According to a large number of literature reports, paper chip microfluidic technology, compared with the standard method, greatly shortens the time, does not require professional laboratory equipment, and can be used for on-site detection, which has certain practical application value. Therefore, paper chips can be used in the rapid analysis and detection of traditional Chinese medicine, and have broad application prospects. At present, there is no literature reporting the detection of tribulus terrestris total saponinsそして、この方法は分析決定のフロンティア研究分野となる可能性があります。

3まとめと展望

A comparison of the advantages and disadvantages of the three methods for extracting tribulus terrestris total saponins can provide a reference for related researchers, who can choose the appropriate extraction method according to different needs. The ultraviolet spectrophotometry and high-phase liquid chromatography methods for testing tribulus terrestris total saponins have been widely used because of the advantages of their popular instruments and equipment and simple operation. Capillary electrophoresis and paper microfluidic technology are emerging separation and analysis techniques. Capillary electrophoresis has broad application prospects in the analysis of natural medicines, and significant progress has been made in this area. Paper microfluidic technology has been used in various fields of research due to its advantages of being fast and simple. With the development of science and technology, extraction methods and detection techniques will continue to improve and better serve the research and development of natural medicines and traditional Chinese medicine.

参照

[1]国立薬局方委員会。ピープルの薬局方'の中国共和国(パートi) [m]。北京:中国医学科学技術出版社、2010年。330.

[2] li baolong, wang kang, zeng wei, et al。研究の進捗状況[j]。『吉林薬学院紀要』2011年32(4):223-225。

【3】白雲傑、劉存芳。ステロイドサポニンの抽出法に関する研究の進展[j]。2015年現代農業科学技術、(15):281-285。

[4] wang xiaoyang, li duowei, ling hu xianwei, et al。直交試験法によるサポニン抽出法の最適化[j]。 ^『仙台市史』第1巻、仙台市、2008年、24-26頁。

【5】曹振彦、魏兵、李斌。粗サポニンの抽出過程に関する研究[j]。^『週刊ファミ通』2015年(平成27年)、74-77頁。

[6] li tl, zhang zw, zhangl,et al. gc-msと結合したマイクロ波を用いた濃縮抽出法による難溶性テロリス中のステロイドサポニンの吸引と測定のための簡便な方法[j]。Joumal 2009年ofseparationscience、32(医疗机関リスト):4167-4175。

[7] xi c, zhang w, hou m, et al。伝統的な中国医学の有効成分の抽出におけるマイクロ波抽出技術の応用。中国医薬産業、2014年、23(3):94-96。

[8] zhang j, wang z . tribulus terrestris l .における全サポニン含有量の決定。chinese journal of clinical pharmacy, 2001, 10(4): 244-246。

【9】張娟、呂金才。サポニンの抽出法および含有量決定に関する研究[j]。^ a b c de f g h『現代医学』、2006年、8(3):25-28。

[10] li yan, hu rong, wang lijing, et al。サポニンの全含有量の決定に関する研究tribulus terrestris l . [j]。江西大学漢方医学誌,2014,26(1):59-61。

[11]李さくら。異なる起源からの困難terrestris l .の品質に関する比較研究[j]。^『漢学年鑑』漢学年鑑、2012年、24頁。

[1 2] zhang ping, zhou xu, wang jiabo, et al。紫外線分光法[j]を用いた、異なる起源からの全サポニン含有量の測定。the journal of the chinese people.com(英語#^『人事興信録』第39版、人事興信録第26版、356頁。

【1 3】張素軍。果実と茎の収穫時期の異なるサポニン含有量の分析[j]。中国実験薬理学会誌,2010,16(13):80-81。

[14] li haoyue, liu shuping, ma xinyue, et al。薬効物質の品質管理のための二重指数法に関する研究[j]。中国の薬剤師,2015,18(4):552-554。

[15] lv dan, tang kehui, wang yuchi, et al。医薬品分析におけるキャピラリー電気泳動の応用[j]。2018年(平成30年)3月19日-21日。

[16]劉Yuanhuai。天然薬物のキャピラリー電気泳動の研究と応用[d]。福岡大学、2004年。

[17] tian tian, huang yishun, lin bingqian, et al。paper chip microfluidic technologyの開発と応用[j]。^『人事興信録』第5版、人事興信録第3版、257-267頁。

[18]徐李Rcvid  R Ballerini、微、シェンマイクロ流体(microfluidics) -マイクロ流体のこと。現状と今後の動向[j]。Biomi - crofluidics.2012 6(1): 011301。

[19] ellerbee ak, phillips st, siegel a c,et  al.Quantifying  colori- paper based microfluidic devices by measuring the transmission of light through paper[j]. anal.chem .,2009,81(20):8447-8452。

【20】呉建、張葉、張孟宇。簡単なペーパーチップの準備とfengdan皮膚の有効成分の検出におけるその応用[j]。化学工学コミュニケーション論,2019,45(1):143。

[21] hao zhenxia, jin lili, zhou sujuan, et al。茶ポリフェノール含有量の高速検出のためのマイクロ流体チップ[j]。分析機器,2016,(b11): 12-13。