どのように酵素的に修飾されたステビアグルコシルステビアを取得するには?

1序文

ほぼ半世紀の間、科学者たちは、肥満と3高(高血圧、高血糖、高脂)の発生を減らすために、ショ糖に代わる低エネルギー価値のショ糖に似た味の甘味料を見つけることに取り組んできました。現在、人工甘味料にはアセスルファム、アリテーム、アスパルテーム、シクラミン、スクラロース、ネオテームなどがある。生活水準の絶え間ない向上に伴い、人々は自然と緑の食品を求めるようになりました。ステビアは、天然甘味料から際立っている。甘味はスクロースの250 ~ 400倍である。ステビアis extracted from the Stevia rebaudiana Berton herb of the Asteraceae family. Its main components are the secondary metabolites stevioside (ST) and rebaudioside A (RA) accumulated in the leaves of the plant (see Figure 1 for chemical structure). such as the secondary metabolites stevioside (ST) and rebaudioside A (RA) (see Figure 1 for chemical structure).

ステビオシドの研究は前世紀の初めに始まりました。今日までに,世界中のステビオシドに関する1,000以上の科学論文や特許がありました,そのほとんどは、ステビオシド抽出技術に焦点を当てて,味の改善と安全性とin vivoサンプルに基づいて毒物学研究。これまで、ステビア消費の安全性については、人体の毒性と代謝に関する資料が不十分で、韓国と日本だけで大量に使用されてきた。fao / who合同食品添加物専門家委員会(jecfa)は、長年にわたる各国の総合的な調査を経て、2008年6月の第69回報告書において、ステビアは1日の摂取量が体重4mg/kg以下であれば、人体への副作用がないことを明確にしました。同年12月、米食品医薬品局(fda)は、高純度ステビアa配糖体(ra含有率95%以上)製品の米国市場での安全性・信頼性(gras)認証申請を「異議なし」の意見で承認した。これが欧米の食品市場でのステビアの普及の始まりである。天然甘味料のステビアは、甘みが強く、低カロリーで、スクロースの代替に適しています[1-3]。

2技術の進歩

工業生産の30年以上を経て、ステビアは第三世代に発展しました。第一世代はステビア、第二世代はstとraの混合物、第三世代はraが主です。その甘さと特徴を表1に示します。ステビアの準備プロセスは、主に次のステップが含まれています:乾燥と破砕ステビアの葉、液相抽出、不純物除去、樹脂処理、スプレー乾燥と精製。

2.1抽出

初期芽の段階でのステビア葉は、ステビア含有量が最も高い。この段階の葉を乾燥して粉砕した後、熱湯やアルコールなどのステビアを抽出するために極性溶媒液相抽出法が通常使用される。超臨界二酸化炭素抽出法はまだ工業には適用されていない。葉に含まれる油、葉緑素、精油などの非極性物質は、クロロホルムやヘキサンで抽出する前に除去することができます[4-5]。抽出方法には、タンク一括抽出法と逆流連続抽出法の2つがある[6]。ステビア抽出物は、葉割れなどの固形不純物を遠心分離、プレート・フレームフィルター圧搾、膜ろ過により除去して得られる[7-8]。

2.2不純物除去

分離とステビアの精製:stevia extract contains a large amount of impurities such as protein, organic acid, tannin, saponin, pigment, and inorganic salt. The content of these impurities is 5-7 times that of the glycoside content [9]. Column chromatography or membrane filtration is commonly used to separate and purify stevia from the stevia extract [10-25].

カラムクロマトグラフィーを使用してステビオシドを分離・精製する場合は、まずステビア抽出物を前処理する必要があります。そうでなければ、一方では、液体供給中の顔料などの不純物は、樹脂を汚染し、樹脂に大量の顔料を吸着させ、グリコシドの吸着を減少させ、吸着サイクルを短縮し、アルコールとグリコシドの損失を増加させ、抽出速度を低下させる。  制作費を提起した。一方、液体中の一部の金属イオンは樹脂の永続的な中毒を引き起こし、寿命を低下させ、生産の正常な進行に影響を与える可能性があります。第三に、製品を飲料製造に使用すると、充填時の沈降や発泡などの問題が発生し、広く使用されるようになる可能性があります。

Therefore, calcium hydroxide and iron sulfate are often used as flocculants to help remove impurities from the stevia liquid. Calcium salts can not only form insoluble calcium salts with organic acids such as citric acid, tartaric acid, succinic acid, malic acid, ascorbic acid and oxalic acid to precipitate, but also with polyphenols, proteins, polysaccharides, 顔料such as chlorophyll, carotene and lutein to form insoluble calcium salts and precipitate. Iron salts can precipitate tannins and metal salts such as copper, zinc, aluminum and calcium. After pretreatment to remove some of the colored substances, proteins and foreign substances in the stevia extract, the stevioside in the extract is selectively adsorbed by macroporous resin, and then eluted with water or an organic solvent. The salts, most of the pigments and other polar impurities in the eluate are removed by anion and cation exchange resins to obtain a stevioside-enriched solution [26].

2.3樹脂治療

樹脂を用いたステビア液体の中国での精製研究は1982年に始まった。1984年、陳徳昌らは江蘇省鎮江市に中国初の樹脂によるステビア浄化工場を設立した。

陽イオン交換樹脂にはアンバーライトir-120b、001×14.5等、陰イオン交換樹脂にはアンバーライトira-93、d-280等が一般的に使用されています。吸着樹脂には、アンバーライトxad-2、ab-8、ジアオンhp-20、ads-7、d107、d108などがあります[27-30]。

膜ろ過を用いてステビオシドを分離精製すると、セラミック微細孔、限外ろ過膜、ナノろ過膜を用いたろ過により、ステビオシドと大きく異なる分子量のイオン化合物や有機分子をステビア液体から除去することができ、ステビオシド濃縮液体が得られる[31]。1998年、カナダ国立研究評議会は、膜ろ過を用いてステビアを精製する方法を開発し、米国で特許を取得した[32]。

2.4噴霧乾燥

濃縮された液体は、冷却結晶化を受けることができます,濃度結晶化またはスプレー乾燥暗い色と原油ステビア製品および主要成分stとraを得るために。活性炭は、結晶化の前に製品を脱色するか、白色製品を得るために噴霧乾燥するために使用することができます。中国のほとんどのステビアメーカーは、製品のこのタイプを生産します[3]。

2.5精油

精制されている金持ちステビアRAまたはサンドリン:差がある溶存量親水性溶剤STおよびRAを隔てて原油ステビア溶剤に溶けるメタノールやエタノールに飽和濃度そしてSTまたはRAクリスタルはセルロース系エタノールと選択的にがなどの方法によって練られた冷却。高純度raを確保するために、結晶はエタノール水溶液に再溶解され、不溶性不純物を除去するためにフィルタリングされ、スプレー乾燥または濃縮されて結晶化されます。

3分析方法

ステビオシドの定性的および定量的分析は、比色、降水、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、薄膜クロマトグラフィーおよび他の方法を使用して行うことができる。China'sの国家規格gb8270-1999は、stの内容に関する試験基準と方法を規定しています。しかし、raを検出するための公式な基準はありません。fcc (food chemicals codex)は2008年に公開討論草案を公表し、高性能液体クロマトグラフィーによるraとstの決定を標準化しました。クロマトグラフィー用カラムにはアミノカラムまたは糖分析用カラムを、移動相にはアセトニトリル水混合液を用いた[34]。

4味改善

Stevioside is mainly used as a low-calorie sweetener in beverages,ヨーグルト,デザートや卓上甘味料[35]。stはある程度の苦味とメントールの味があり、甘みの特徴は完璧ではありません。RA&#それはraを浄化するために、より複雑であるため、しかし、97%のraを含むステビアはまだstの特定の後味を持っています。ステビアの味を向上させるための3つの主な方法があります。

4.1他の風味増強剤を加えて、複合甘味料を作成します

A compound sweetener is formed by mixing ST with other taste masking agents and sweetening enhancers. By taking advantage of the synergistic effect between various sweeteners and physiological characteristics, it can reduce unpleasant tastes, shorten the time it takes for the taste to develop, and improve the stability and richness of sweetness. It can maintain the special functions of a single sweetener, bring out new flavors, and reduce costs [36-40].

4.2ステビアのra含有量を増やす

植物学者は、より高い甘味料や新しい甘味料を持つ植物を見つけるために、南米のキク科の220種以上の植物を研究してきました。しかし、stを含む植物は、stevia rebaudiana bertoniのみである。この植物は1899年に発見され、現在は絶滅している。

ra含有率の高いステビアの栽培は数十年前から行われており、日本はステビア品種の改良とその応用に関する研究において最も優れた国の一つである。わが国が独自に栽培した一部のステビアを除いて、ここ数年間、国内で使用したステビアは主に日本産だ。日本の品種モリタは、相対的に低価格で優れた品質特性を持ち、中国のステビア栽培分野で大きなシェアを占めています。しかし、品種は深刻に退化しており、中国のソースの安定性と発展に悪影響を及ぼしています#39; sステビア産業だ。中国の南京植物研究所、青島創生公司、山東華先stevia有限公司、塩城下関stevia貿易有限公司などの単位も、糖質が高い品種を開発した。表2は、いくつかのステビア品種の乾燥葉中のステビオシド含有量を示している[41-43]。

植物のra含量を増加させるための新品種の育種に加えて、stをraに変換する化学的方法も報告されている[44]。店舗の差STおよびRAはブドウ糖台数をC13位置に付着しsteviol配糖体(図1参照)に変えるSTのRAのカギは選別的に加水分解うとβ-sophorosideと端末砂糖エーテル連動によるstevioside分子から抽出された酵素「Takadiastase Y」生物麹菌、製品Rubusosideを取得する。グリコシド分子β-sophoroside、端末配糖体エーテル連動するのは、選択的に加水分解を取得する製品のstevioside Rubusoside。ルブソシド(rubusoside)は、バラ科の植物rubus suaviss musから抽出される天然のジテルペン配糖体である。c19位のグルコース基がアルカリ加水分解によって除去された後、フェニルアルデヒドを用いてアセタールを形成し、c13位のグルコース基の水酸基c4およびc6を保護する。権や団体C19-carboxylic酸ヒドロキシするとヒドロキシ団体C2 C3の執着しC13グルコースビタミン・カルボン酸ヒドロキシ今まさにC19練乳ブドウ糖団の新設を、そして水酸化バリウムはメタノールの保護団体の解決策を除去するためRAを得る。

4.3酵素修正

酵素修飾は、ステビアの味を改善するために一般的に使用される別の方法である。糖の生成機構を研究し、酵素の触媒作用を利用することで、stやraにグルコース(glc)やフルクトース(fru)などの特定の基を付加し、スクロースに近い味にする。酵素修飾ステビアは、スクロースよりも約100倍甘いです[45 - 47]。

(1) αを−1、4-glucosidase(例えば、cyclodextrin glucanotransferase)、ブドウ糖を介してsteviosideに追加単位α-addition反応ステビアの余韵の向上させる。しかし、酵素反応が進むにつれ4ヒドロキシ业部steviosideに縛られブドウ糖では、新ブドウ糖チーム側ともう少し线力学を持つα1によれば、ブドウ糖4-addition反応形成長い鎖をする。生成されたαの甘さ加減-glucosylほどstevioside周りが減る効果45%を変更前と比較する。修正αの甘さ加減-glucopyranosylほどstevioside周りが減る効果45%に過ぎない。β-amylase长时间を切るために用いできる短縮のブドウ糖鎖製品の質を向上させなければ[48-49]。

(2)β−1、4-galactosyltransferase、disaccharides(例えば、乳糖、α-D-galactose、等)構成半乳糖とブドウ糖をβとして使用することができる−1、4-galactosyl関係者を組み合わせブドウ糖チーム13-position骨格からsteviol (13-G1)という)に、2ブドウ糖団体1 3 -G1の2ブドウ糖エレメント13 -G1 (13 -G3 13 -G2と言わ)、これらの4つのブドウ糖ユニットは必ず19位置を骨格からsteviol (19 -G1)、きれい事1つの半乳糖ユニットをことによって変成はβ−1、4債券1 ~ 3ブドウ糖台。2007年9月、大日本インキ化学工業株式会社(dicファインケミカルズ)はstおよびra誘導体のgstおよびgraの調製に本法を用い、米国特許を取得した。graとgstは、高い甘味を維持しながら、砂糖のようなまろやかな甘味があり、後味がよく、stの苦い後味を抑えている[50-51]。

(3)β-fructofuranosidaseを用いてhydrolyzeショ糖リン酸の作用で、果糖グループSTおよびRAを紹介します果糖パケットを6-OHと結び付け19-O -β-glucosylグループβ= 2によって6 glycosidic債券。

酵素修飾ステビアはstの後味を効果的に調整することができるが、糖の摂取量を増加させるため、糖尿病患者には適していない。

5、国内での自主的開発

中国における食用ステビアの開発は、1970年代に南京中山植物園で始まった。2000年にはChina'のステビア抽出物の輸出は私たちよりも少なかった$100万。2006年以降、輸出が加速し、2009年には既に2000年の84倍、約2,500トン(ショ糖の甘味量675,000トンに相当)の輸出がありました。10数カ国に輸出され、年間生産高は6億元を超えています。中国は「ワールド&」になりました#39;sステビア配糖体の主要な生産・輸出国[52]。国内ステビアメーカーは山東、江蘇、安徽、福建、河南などに集中している。

6アプリケーション

More than 500 years ago, the Paraguayans already used stevia to make sweet tea. Stevia was approved as a food additive in South America and some Asian countries such as China, Japan and South Korea in the last century. The US Food and Drug Administration (FDA) issued a Generaly Recognized as Safe (GRAS) notification in 2008, confirming that they “have no objection” to the use of RA as a zero-calorie sweetener with a minimum purity of 95%.

フランス、オーストラリア、ニュージーランド、スイスもra食品添加物のライセンスを発行しています。2008年、jecfaはra adiを0 - 4 mg/kg体重/日と発表した。ステビアrebaudianaは消化管の酵素によって分解されません。ステビアは胃と小腸を通って結腸に入り、腸内微生物によって発酵されて短鎖脂肪酸を生成する。ステビアのカロリー値は短鎖脂肪酸によって間接的に生成され、約6.3 kj /gである。ステビアは、乳製品、アイスクリーム、キャンディー、焼き菓子のカロリーを減らすために砂糖の代わりに多くの国で使用されている低カロリーの甘味料です。

また、ステビオシドの難消化性は、その摂取量が血糖値を上昇させず、またインスリン値の上昇を促進しないことを意味し、糖尿病患者の使用に適している。また、血糖値を下げたり、虫歯を予防したり、胃を強化したり、疲れを癒すなど、ステビアには薬効が期待されています。肥満、糖尿病、心臓病、高血圧、アテローム性動脈硬化症に苦しむ患者をサポートする効果があります。

ステビアの主成分であるstおよびraは、酸およびアルカリに対して良好な熱安定性を有し、粉末または溶液の形であっても光に対して非常に安定である。また、スクロースのように熱処理後に最終製品が茶色になることもありません。炭酸飲料、紅茶、ワイン、コーヒー、ビスケット、お菓子、チョコレート、アイスクリームなどの乳製品、果物や野菜ジュース、魚介類、肉、薬、化粧品、その他の日用品に使用することができます[53]。

のworld&#コカコーラ39;s飲料会社で最大手の2社です、セーフウェイのすでに:stevia-sweetened製品を開発しているコカコーラは農業会社カーギルTruviaを開発しているセーフウェイは、会社側にグローバル甘味料PureViaを開発の発売を促進するため低カロリー飲料製品の販売を高めようとしています

7展望

アスパルテーム、シクラミン、アセスルファム、サッカリンなどの伝統的な無糖甘味料と比較して、ステビアは自然で安定して安全であるという利点があります。ステビア栽培は経済的価値が高い。乾燥ステビアの収穫量は、250 ~ 300 kg / muであり、乾燥ステビアの価格は糖鎖の含有量によって異なります。南部では年に2回ステビアを収穫できます北部では、農民が冬小麦と一緒に季節を変えて栽培することができ、効果的に収入を増やすことができます。ステビアを使用してショ糖を交換するコストは、ショ糖のコストの20%から40%に過ぎません。一般的に、ステビアは90%以上の純度があり、2%のショ糖溶液ではショ糖より250倍、5%のショ糖溶液ではショ糖より200倍甘い。

Stevia has been used in Japan and South Korea for more than 30 years and is widely used in beverages, food and medicine. In recent years, the use of stevia in Japan has increased by 20% to 30%. South Korea is not suitable for growing sugar beets and sugar cane, and completely depends on imports of sucrose, so there is a strong demand for sucrose substitutes. Since its introduction in 1973, stevia has captured 40% of the Korean sweetener market, most of which is used in traditional Korean soju. In addition, the amount of stevia used in ice cream, chewing gum, candy, kimchi, beverages, sauces, etc. is also increasing. Stevia is in line with today'の消費者の概念「自然、緑、安全、およびヘルスケア」。現在は『the world』に所属#このようなコカ・コーラ、カーギル、ペプシコなど39のトップ500企業は、大幅にステビア産業の発展を促進する世界規模でステビアに投資しています。ステビアは、スクロースの代替品として最も有望であり、市場での認知度がさらに高まることが期待されています。

参考:

一石二鳥ですKinghornAD。[1]stevi thegenusstevia [m]。ロンドン:テイラー&2002 Franci。

[2] 王ドクヒ。ステビオシドの甘さ,甘さと苦い後味[j]。中国食品添加物、2007(3):46-53。

[3] スウィートグリーンフィールドに告ぐs . fodanddrugadm中- istration(fda)   thattheuse ofRebiana (RebaudiosideA)  成分が一般的であるとしてステビアrebaudianaからde-rived,認識されたassafe, ashingtond。C、grn000282、  2009.

[4] 劉震龍(J OngCP、  リス年度だ。亜臨界流体抽出ステビアrebaudianaからのステビア甘味料[j]。JournalofChromato - graphicScience 1997年   35:446 450.

[5] wisdom naturalbrands gras査定高純度糖体[m]。女ashington、 ・d・C: grnそこのための方法—plantraw材料からcoveryofsteviosides [p]。US4892938、   1990.

[6] yu jun, yue pengxiang, yu hong, et al。三段対向電流法によるステビオシド抽出プロセスに関する研究[j]。^ a b c d e f g h i(2009)、146-148頁。

【7】  KutowyO、   チャン・ナイキSQ  言い伝えられて。ステビアrebaudiana bertoniから甘いcom-ポンドの抽出[p]。US5972120、  1999.

[8] chen t f .液体ろ過装置[p]。2005年US2005155935された。

[9]清时臣。ステビオシドの生産における凝集剤の探索[j]。中国食品添加物、1998(2):40-41。

[10] KinghornAD、   SoejartoDD。現在のステビオシド甘味料人間用[m]。薬用植物と経済植物の研究を進めています   ^『仙台市史』通史編1、通史編1、通史編1、通史編1、通史編1、通史編1。

[11] Kinghorn D、   soejartod d . stevioside [m]。代替甘味料(2 nd edn,  改正andExpanded)ニューヨーク:MarcelDekke社、   1991:157 -171。

[12] BakalA O ' NaborsLフォロースルー、   代替甘味料ニューヨーク:marcel dekke inc,ニューヨーク,19 96:2 95 -307。

[13] phillips k . c . steviステップの新しい甘味料の開発[m]。DevelopmentsinSweeteners-3、   ロンドン:ElsevierAp - ^パウサニアス、1巻19・1。

[14] JacksonM C   FrancisG J  チェイサーg .高収量生産方法purerebaudiosidea [p]。US20060083838、  2006.

【15位】 HidejiN、  TadaoM、   TadashiK、    ベタの製造プロセス  グリコシルステビオシド誘導体[p]。US4590160、    1986.

[16] Dobberstein RHマイナスの   ahmedm s .から選択された甘い配糖体を抽出する方法 ステビアの植物 P]。US4361697、   1982.

〔17〕MagometM、   TomovT、  SomannT、  etal process formanufac- turinga sweetneranduse thereof[p] . us 2007082103,  2007.

[18] プラカシュ DuBoisGE、  A KingG   etal rebaudioside a composition and method forpurifying rebaudiosidea [p]。US20070292582、   2007.

[19] AbelyanVH、  GhochikyanVT、  MarkosyanAA、   ステビアレボディアナ植物からの糖鎖の分離と修飾[p]。2006年US2006134292た。

[20] YangM F HuaJ、 QinL。High-PurityRebaudiosideAAnd MethodOfExtractingSame [P]。US2008300402、   2008.

[21] PayzantJD、   LaidlerJK、   IppolitoRM。thesteviarebaudianaplantから選択された糖鎖を抽出する方法[p]。US5962678、   1999.

。[22] 三宅t .甘味料製造工程[p]。US4219571、   1980.

[23] ステビオシドを生成する方法[p]。US3723410、   1973.

[24] MoritaT、  藤田IwamuraJている。Sweeteningcompound、  この方法を光復節(クァンボクチョル そして、それを使用する[p]。US4082858、   1978.

[25] KutowyO、   ZhangSQ、  言い伝えられて。stevia rebaudiana bertoniからの甘い化合物の抽出[p]。1999年US5972120しました。

[26] chen shaoqiu, yang yinghua, zhai zhiqiang。ステビオシドの抽出過程に関する議論[j]。教育と研究:河北農業大学邯淡誌、1991(3):1-3。

[27] chen t h, zhang y, liu x h, et al。ピリジン基を含む新しいタイプの樹脂によるステビアからのステビオシドaの濃縮と分離。中国の科学b, 1999, 29(5): 461 - 466。

[28] liu zonglin, peng yijiao, guo yang, et al。ステビオシドの抽出と結晶化プロセスに関する研究[j]。2002年食物科学専攻、23日(8日):99-100。

【29】石佐清、石栄辅、馮俊謙ステビオサイドの一段階抽出ads-7吸着樹脂応用研究[j]。中国食品添加物、1995(2):18-21。

[30] hu jing, chen yuru, wei xia, et al。d107とd108を用いたステビアからのステビオール配糖体の分離[j]。2008年(平成20年)4月1日-4号機が完成。

【31】何長生、王炳南、朱南山。ステビオシドの限外ろ過の応用に関する研究[j]。^『人事興信録』第2版、89-94頁。

【32】黄松連、陳天順。ステビオシド精製液中のステビオシド含有量に対する活性炭phの影響[j]。日本食品工業会,2009,30(1):133-135。

[33] more j . rebaudiosidea [m]。fc 6:1438に2番目の補遺。

[34]リンドレイムg .低カロリー甘味料の開発[j]。fod成分sand processing international 2000,   22 (17-20)。

[35]清时臣。脱臭のためのステビオール配糖体製品の開発と特性評価[j]。中国食品添加物、1994(4):25-26。

[36]郭樹橋、楊宇文、倪万超。クローニングとバイオインフォマティクスによるstevia rebaudiana glucosyltransferase遺伝子ugt76g2の解析[j]。2009年ゲノミクスや応用生物学、28(3),422-428。

[37]江蘇省植物研究所、中国科学院。優れたステビア品種の育種・伝播技術の研究[m]。2002.

[38]ヤンy .新しい品種のためのステビア植物育種と改善プロセス[p]。CN03131156。3、03。

[39] KanedaN、  KasaiR、  YamasakiK、   etal化学研究スイートジテルペン-グリコシデソステビアrebaudiana:変換ステビオシドintorebaudiosidea [m]。Chemicaland Pharmaceu - ticalBulletin25、    1977年   2466 - 2467。

[40] 李新華、王斉、史晨。ステビアの苦味の改善に対するグルコシルトランスフェラーゼの作用の効果とメカニズムに関する研究[j]。^『仙台市史』仙台市史編纂委員会、2009年(平成21年)、65 - 65頁。

[41] EsakiS、  TanakaR、  本当にiyaSわ合成と味特定のステビオール配糖体[j]。、1984年(昭和59年)AgriculturalandBiologicalChem istry  」48番目:1831 -1834。

[42] duboisg e bunesla dietrich p s甘味料合成および感覚評価ステビオシドの生物学的に安定な類似体[j]。農業食品化学誌 1984年   32:1321-1325。

[43] DuBoisGE、StephensonRA。ジテルペノイド甘味料合成とセンサーの評価ステビオシドanalogueswith miは有機的に証明されたep- ticpropertiej]。1985年(昭和60年)JournalofMedicinalChemistry 28:93  98.

[44] MizutaniK、  MiyataT、  KasaiR、   エターアルstudyon of sweetnessof steviolbisglycoside selective enzyme transglycosylation ofthe13 - o- glycosylmoiety[j]。Agricu turalandBiologicalChemistry、 1989年   53:395-398。

[45] tanaka o .天然甘味料の味の改善[j]。PureandApplied化学istry、 1997年  『69:675年-683。

[46] NishihashiH、  MatsubayashiT、  Katabam、   エタールの甘味料と製造プロセスsame[p] . us 7267835,  2007.

[47] NishibashiH、  MatsubayashiT、  Katabam、   ステビア甘味料の味をmiprovingためのエタール法[p]。S58094367、   1983.

[47] 徐仲衛、李娜、寧正祥。ステビアの酵素修飾に関する研究[j]。2008年(平成20年)3月31日:ダイヤ改正。

[49] 森田T  hosono f . alpha -グルコシル化ステビア甘味料[p]。 H09-107913、   1997.

[50] xu zhongwei, shao peixia, chen huayong, et al。修正に関する研究β-fructosidase-catalyzed steviosideか[J]。^『科学技術史』第2巻、科学技術研究所、2008年、24頁。

【51】黄英森、郭愛奎。r-a型ステビオシドの開発[j]。^『人事興信録』第5版、人事興信録第4版、1992年、29-32頁。

[52]十勝忠。ganjian県ステビア産業の発展に関する報告を拡大し、強化するための革新的なアイデア[j]。現代のガーデニング(2009):2-3,14。

[53] zhao yongliang, zhu huanling, liu jingbin, et al。rebaudiosideの比較研究ステビアのコンテンツは、異なる起源から葉[j]。安徽農業科学紀要(upper half monthly), 2009, 15(21): 82-83。