グルタチオンは養殖でどのように使われていますか?
グルタチオンは、グルタミン酸、システイン、グリシンとスルフヒドリル基からなるトリペプチドで、細胞内で合成される最も重要な低分子抗酸化物質です。自然界では還元型グルタチオン(gsh)と酸化型グルタチオン(gssg)の2つの形態で発生する。GSHと読むのが通例であるGSH "[1]、sulfhydrylグループとγを持つ-glutamine。gshは、フリーラジカルの除去、免疫の強化、キレートや解毒など、多くの生理機能を持っています[2]。
高濃度養殖業の発展に伴い、水生疾病が深刻化しており、食品の安全性を重視する国が増えている。安全で効率的な飼料添加物は、養殖動物の健康問題を解決し、養殖動物の収量と品質を向上させるための鍵となっている。
近年、グルタチオンの養殖への応用が広く研究され、飼料添加物開発のホットスポットとなっています。本論文は、国内外の養殖業におけるグルタチオンの生産と応用に関する最新の研究成果をまとめ、養殖動物のさまざまな側面におけるグルタチオンの原理と効果を解明することで、養殖業におけるグルタチオンの応用のための新しい科学的アイデアを提供することを目的としています。
1.グルタチオンの源と代謝
1.1グルタチオンの源
グルタチオンは主に体内で合成・還元されます。GSH肝臓の合成を仕込み二段酵素反応解媒のことによって、セルγ-glutamylcysteine synthetase (GSHIまたは現場γ意識レベルGCS)とグルタチオンのsynthetase (GSHIIやGS)グルタミン酸を使って基板としてグリシン[3]。GSSGは合成を仕込み二段酵素反応解媒γ-glutamylcysteine synthetase (GSHIまたは現場γ意識レベルGCS)とグルタチオンのsynthetase (GSHIIまたはGS) [3];gsh還元経路は主に、細胞内gssgがグルタチオンレダクターゼ(gr)によってgshに還元されることを伴う[4]。
また、gssgは、硫酸転移酵素の作用によってgshを生成することができ、またはアスコルビン酸と反応してgshを生成することができます;gshが枯渇または不足した場合、哺乳類はメチオニンを利用してgshを生成することができます[5]。
1.2グルタチオンの代謝
グルタチオンの完全され浸透さことができる小腸[6]、すい臓の手間だなんて利恵になどを通じて肝臓など代謝の一部のゴミ拾いを完了さフリーラジカル、デトックスや他栄养素?成分の輸送や機能は正常【7】いますそしてこの土地、腎臓たちに吸収量GSHの要地である血液プラズマからGSHを撤去させる。老化、毒性、感染症、酸化ストレスなどの有害な条件は、細胞内gshの合成を減少させ、体内のgshレベルを低下させる可能性があります。
2. グルタチオンの製造方法
2.1直接抽出法
直接抽出法は、主に有機溶媒を用いて、グルタチオンを豊富に含む動植物組織(トウモロコシ胚芽や小麦胚芽など)からグルタチオンを原料とし、アミラーゼやプロテアーゼによる処理を経て、分離・濃縮・乾燥させて得られる[8]。しかし、直接抽出法は、純度が低く収率が低いという問題があり、工業化された生産や応用には適していません。
2.2化学合成
化学合成によるグルタチオンの生産は1970年代に始まった。グルタチオンはグルタミン酸、システイン、グリシンから基保護、縮合、脱保護の段階を経て合成される[9]。この方法は、以前からグルタチオンの製造に応用されていましたが、複雑な操作、高コスト、長時間消費、深刻な環境問題など多くの問題を抱えていました。
2.3酵素方法
酵素合成グルタチオンの合成処理を指すグルタチオンのが経てばL-glutamic酸を使用して、L-cysteineとグリシン基板、2グルタチオンのsynthetasesを追加、現場γ意識レベルGCSとGS、自然生物から取得により得られた画像データを合成するそしてグルタチオンの両国synthetasesが一歩一歩またこの二つの反応はいずれも、アデノシン三燐酸(ATP)エネルギー[10]を提供する。どちらの反応もエネルギーとしてアデノシン三リン酸(atp)の付加を必要とする[10]。したがって、グルタチオンの酵素合成はより効率的ですが、酵素活性やatp価格の影響を受けやすいのです。
2.4微生物発酵
抽出法、化学合成法、酵素法に比べて、発酵によるグルタチオンの生産は、生産速度が速く、反応条件が穏やかで、低コストで、汚染が少ないという利点があり、大きな発展の可能性を持つグルタチオン生産の主な方法となっている。
グルタチオンの生産には2種類あり、1つは、saccharomyces cerevisiae、candida utilis、pseudomonas fluorescensなどの従来の突然変異育種から得られた高収量株である[11-13]。2つ目は遺伝子組換え細菌(gebs)で、これは組み換え技術を用いてグルタチオン合成のための遺伝子を他の微生物に導入してグルタチオンを生産するもので、現在ではほとんどが出芽酵母saccharomyces cerevisiaeや大腸菌を担体として遺伝子組換え細菌である[14-15]。
微生物発酵によるグルタチオンの生産に影響を与える要因は、菌株のほかに、微生物発酵制御技術やグルタチオン精製技術などがあります。微生物の発酵制御技術は、培地、培養条件の最適化、発酵プロセスの制御を含む。また、グルタチオンの精製技術には、溶媒抽出、熱湯抽出、高圧均質化などがある[16]。現在、グルタチオン製造のための微生物発酵技術は比較的成熟しており、大規模な工場生産が可能であり、発展の可能性が高い。
3.水生動物におけるグルタチオンの応用
3.1グルタチオンの水生動物の成長性能への応用
グルタチオンを水生動物の成長に応用した例としては、eriocheir sinensis[17]、mylo-pharyngodon piceus richardson[18]、litope - naeus vannamei[19]などがありますグルタチオンには成長促進作用があります水生動物に効果がある。litope-naeus vannamei[19]などの水生動物を用いた研究で、グルタチオンには成長促進作用があることが示されています。水生動物に対するグルタチオンの成長促進作用は多面的である可能性がある。まず、グルタチオンのを加えたの放送がに前向きな効果を及ぼす水生動物の分泌が内分泌up-regulateできるインスリン様成長の表現成長因子Iと成長ホルモン遺伝子、こうして成長ホルモンの分泌がと甲状腺ホルモンを促進し、水生動物の成長をさらに促进する上、います
mingら[20]は、飼料に407.45 mg/kgのgshを添加すると、ソウギョ(ctenopharyngodon idella)の肝臓におけるインスリン様成長因子iの発現が促進され、ソウギョの体重増加率が増加することを示した。第二に、グルタチオンには、補酵素aの構成要素の一つであるシステインが含まれており、成長阻害ホルモン分子のジスルフィド結合を切断し、成長阻害ホルモンが成長ホルモンに与える阻害作用を緩和し、草本植物の成長を促進させることができるxiaoらは[22]、システアミン塩酸塩(csh)の腹膜注射をソウゴケに投与すると、血清成長ホルモンのレベルが有意に上昇し、その後、ソウゴケの稚魚の短期成長が促進されることを発見した。また、gshは稚魚の短期成長を促進するために使用することができます。
また、gshは栄養素の吸収を促進することで水生動物の成長を促進することができます。feng gupanら[23]は、飼料に0.30 g/kgのgshを添加すると飼料係数が低下し、procambarus clarkiiの体重が増加したことを示した。ニジマス(oncorhynchus mykiss)では、食事に200 mg/kgのgshを添加すると、摂取量、体重増加、および特異的成長速度が増加することが示された。24[19] wangらは、gshを75 ~ 150 mg/kg添加すると、ワナメイの餌摂取量と体重増加が増加することを示した。- litope naeus vannamei (litopenaeus vannamei)腸壁の厚さと特異的成長率。320 mg/kgのgshを飼料に添加すると、gift oreochromis niloticus(ティラピア)のタンパク質効率が有意に向上し、成長が促進された[25]。
3.2水生動物における抗酸化ストレスへのグルタチオンの応用
集約的な養殖の継続的な発展に伴い、水生動物にストレスを引き起こす要因がますます多くなっています。酸化ストレスとは、体内の酸素フリーラジカルの含有量が増加し、体内の酸化と抗酸化のバランスが崩れて酸化ストレスが発生することです[26-27]。酸化ストレスは水生動物の免疫力を低下させ、組織の損傷を引き起こし、成長を遅らせ、最終的には水産物の収量と品質を低下させます。
内因性抗酸化物質として、グルタチオンは生体の抗酸化系において重要な役割を果たしている。まずグルタチオンのはのnon-proteinで最も豊富sulfhydryl化合物が経てばsulfhydryl組のGSH直接を制限し電子を提供することができる自由急進派に下げる毒性物質になり、それからまた、別と反応GSSG形に積極的にグルタチオンのし、するフリーラジカルを低減する効果があることを達成できるフリーラジカル維持代謝が経て[28]。さらに、gshとgssgは体内で相互変換できるため、細胞の酸化還元状態のバランスを維持するための酸化還元バッファとして使用することができます[29]。
飼料にgshを添加すると、水生動物のgshの蓄積を増加させ、それによって体内の酸化ストレスのレベルを低下させ、抗酸化酵素の活性を高め、体の抗酸化能力を高めることができます。ターbot (scophthalmus maximus)、中国のカニ、サバ、南米白エビ、シーバス(lateolabrax japonicus)やその他の水生動物の研究では、飼料に適切な量のgshを添加すると、体内の抗酸化活性が高まり、抗酸化能力が向上することが示されています[5,17-18,30-31]。しかし、グルタチオンを過剰に摂取すると、水生動物の抗酸化能力が低下する可能性があります。これは、グルタチオンが高濃度でdnaにダメージを与え、その結果として酸化促進効果が生じるためと考えられます[32-33]。
3.3養殖動物へのグルタチオンの応用'免疫性能
養殖の過程で、高い養殖密度、飼料の酸化と酸性化、水生環境の悪化は、養殖動物の免疫能力の継続的な低下と罹患率の大幅な増加をもたらした[34]。gshは、多くの方法で養殖動物の免疫性能を向上させることができます,すべての最初の,動物の免疫力の低下'の体は、多くの場合、酸化ストレスに関連しており、gshは、体内の重要な抗酸化物質として、酸化ストレスを抑制し、免疫性能を向上させるために余分なフリーラジカルの除去に関与することができます[35]。体内の重要な抗酸化物質として、gshは過剰なフリーラジカルの除去に直接関与し、酸化ストレスを抑制し、免疫力を向上させることができます[35]。
第二に、gshは、動物の体の活性因子を調整することによって、体の免疫機能を高めることができます。zhou yanlingら[36]は、飼料に357.69 mg/kgのgshを添加すると、稚魚pelteobagrus fulvidracoのリゾチーム(lzm)、アルカリホスファターゼ(akp)、アシドホスファターゼ(acp)の濃度が上昇する可能性があることを示した[37]。 幼魚におけるlzm、アルカリホスファターゼ(akp)、酸性ホスファターゼ(acp)活性、免疫グロブリンmの増加、4レベルの補完。Eriocheir草の研究では、600 mg / kg示す900 mg / kgのGSH飼料にする1,700万円ほど活動のimmunoenzymes塩化リゾチームなどの活動を減らす有料方受容体(TLR1) 1 .、有料受容体2 (TLR2)、とTLR2 (TLR2)のレベルを増やすimmunoglobulin M、および補完4を有する。toll様受容体1 (tlr1)、toll様受容体2 (tlr2)、および骨髄分化因子88 (myd88)がエリオケイルシネシスの免疫性能を向上させる[17]。
ユキはらた。[21]結果500 mg / kg、グルタチオンの飼料にする中国の免疫性能を向上させることが出来てカニ豊年(Eriocheir草)の表現規制されInterleu - kin-1β(IL-1β)、インターロイキン- 6 (IL-6)腫瘍壊死因子-α(TNF -αTNF -αTNF -αTNF -αTNF -αなども免疫な要因。[22]。インターロイキン- 6などのinflammation-related遺伝子表現(IL-6)インターロイキン- 6 (IL-6)腫瘍壊死要因-α(TNF -α)刺しと質を落とし肝臓炎症アンモニアストレスによる共通の免疫力を増すが生き永らえ(Cyprinus carpio)。
グルタチオンは免疫細胞の活力を高め、免疫細胞の増殖を促進する。oreochromis ni—loticus×o . aureusの試験では、適切な量のgshを外因的に添加すると、若年のoreochromis ni—loticusの頭部のマクロファージの呼吸バーストが増加し、免疫調節に関与することが示された[37]。zhao hongxiaら[38]は、飼料中のgshの増加に伴い、ソウギョの血液中の白血球数が増加し、ソウギョの非特異的な免疫機能が強化され、病気に対する抵抗力が強化されたことを示した。
3.4グルタチオンの水生動物の解毒への応用
gshの解毒メカニズムは、2つの側面から構成されている:一方では、重要な抗酸化物質として、gshは、生物の過剰なフリーラジカルを除去することができます;一方、gshはいくつかの酵素を介して脂質過酸化を抑制し、酸化ストレスによる有害物質の悪影響を軽減し、その毒性を緩和することができます。zhou yanlingら[39]は、幼若のpelteobagrus fulvidracoの食事に357.69 mg/kgのgshを添加すると、抗酸化能力が向上し、アンモニアと窒素に対する耐性が高まることを示した。ソウギョでは、407.45 mg/kgのgshを添加すると、抗酸化酵素の活性が増加し、生物の抗酸化能力が向上し、ミクロシスチンによる損傷が減少することが示されたが、gshを過剰に摂取するとマイナスの効果もあった[20]。oreochromis niloticusの研究では、gshが脂質過酸化を緩和し、肝機能を改善し、アフラトキシン中毒を緩和することが示された[40]。
一方、gshは様々な毒性物質やその代謝物と結合して非毒性の付加物を形成し、動物から排出される。pelteobagrus fulvidracoでの研究では、グルタチオンがミクロシスチンと結合してより親水性の生成物を形成し、より容易に排泄できることが示されている[41]。ren sjらは[42]、グルタチオンがphoximとの中間生成物を形成し、それによってcarassius au-ratus gibelioの肝臓におけるphoximの残基値が低下することを示した。実験は、一定の集中力を発揮しティラピアナイル鉛飼料にする適応でGSH内容の拡大をもたらしhepatopancreasおよびとのGSH内容減少で鉛含有量が増大する能力を言われる金属に団地組みGSHイオンの数はこの団地が被疑者を集約してカラダから急速に排泄、したがって効果素早いデトックス[43-44]います
4.概要・展望
グルタチオンは様々な方法で生産されていますが、その中でも化学、酵素、生物学的手法が工業的に利用されており、養殖への応用のための良い基礎を築いています。gshは、水産物の品質向上だけでなく、水生動物の健全な養殖にも大きな可能性を秘めています。国内外の研究者は、gshの養殖、特に水生動物飼料への応用について深く研究している。しかし、グルタチオンは水溶性でphが低いため、その開発・利用が制限されています。このため、今後の研究では、グルタチオンの飼料加工の最適化を強化し、gshと他の栄養素との連携を検討し、グルタチオンの効率的な利用を実現することが期待されます。
参照:
[1] robert j ., shan l . f .。グルタチオンの調製と応用[j]。』エンターブレイン、2007年、28頁
(15): 15
[2] zhao hongxia, cao junming, zhu xuan, et al。 草の成長性能、血清生化学的指標および体組成に対する食餌性グルタチオンの影響[j]。^『官報』第2020号、大正5年(1915年)5月5日。
[3]ホルマンh j、zhang h、rinna a .グルタチオン:その保護作用、測定、および生合成の概要[j]。 2009年(平成21年)3月30日:1- 2丁目を設置。
[4] mittler r .酸化ストレス、抗酸化物質およびストレス耐性[j]。^ a b c d e f g h『植物学の動向』、2002年(9)、405-410頁。
[5]劉小华。penaeus vannameiにおけるグルタチオンによる抗酸化防御の制御機構[d]。博士論文。2010年-華中農業大学教授。
[6] richie j p, nichenametla s, neidig w, et al。グルタチオン経口補充に関するランダム化比較試験[j]。 グルタチオンの[J]。 ^「european journal of nutrition」。european journal of nutrition(2014年). 2014年2月25日閲覧。
[7]膵におけるgithens s .グルタチオン代謝と肝臓、腎臓、および小腸における代謝との比較[j]。1991年国際学術誌「ネイチャ・フォトニックス(Pancreatology、8(2):97-109。
【8】徐麗萍、王心、興超。溶媒法による還元されたグルタチオンの精製過程に関する研究[j]。食品産業科学技術,2011(12):348-350。
[9]ソ・ジョンウQiuxia。グルタチオンの化学合成[d]。博士論文に。上海:東華大学、2010年。
[10] jiang y, tao r, shen z, et al。酵素bifunctionalによるグルタチオンの製造γ-glutamylcysteine synthetase /グルタチオンのsynthetase体外酢酸重なりkinase-based ATP代か[J]。適用され生化学&2016年バイオテクノロジー180(7):1446-1455。
【11】呉正、雷民、蔡俊。細胞外グルタチオン生産工場の変異原化と発酵最適化' s酵母か[J]。食品研究開発、2023 44(3):201-207。
[12]王大慧、聶敏、魏公園。二段階アミノ酸付加に基づくグルタチオン高収率発酵法[j]。」。food science(2017年). 2017年8月22日閲覧。
[13] shi zheng-yu, yi yi, su jia-min, et al。pseudomonas glutathione fluorescensの発酵条件の最適化[j]。2017年(平成29年)3月31日-35日。
[14] kobayashi j, sasaki d, bamba t, et al。遺伝子工学を用いたリグノセルロース由来糖からのグルタチオンの持続可能な生産 Saccharomyces cerevisiaeは[J]。 applied microbiology and biotechnology, 2019, 103(3): 1243-1254。
[15] zhao xiang, sun chao, tang liwen, et al。新規組換えグルタチオン合成酵素細菌の発酵過程の最適化[j]。中国新技術新製品、2020(8):1-3。
[16] liu xiuji, zou qun, qin xian-wu, et al。グルタチオンの微生物生産に関する国内研究の進展(1990-2020)[j]。三峡大学ジャーナル:自然科学版,2022(4):90- 106。
[17] liu j d, liu w b, zhang d d, et al。食事量の削減されたグルタチオン補給は、カラフトガニ(eriocheir sinensis)の成長、抗酸化能力、免疫力を向上させることができます。chinese mitten crab, eriocheir sinensis[j]。魚&^パウサニアス、2巻20・30・30。
[18] chen coco, li rui, li tongtong, et al。グルタチオンの減少が稚魚の成長性能と生理機能に及ぼす影響[j]。現代農業科学技術2020年(20):182-185。
[19] wang x, xu w, zhou h, et al。実用的な食事でのグルタチオン補給の減少は、エビの成長、抗酸化能力、耐病性、および腸の形態を改善する。エビライトープの病害抵抗性と腸形態- naeus vannamei[j]。魚&^『仙台市史』通史編、2018年、152- 157頁。
[20] ming j, ye j, zhang y, et al。食餌最適還元型グルタチオンは、ミクロシスチン- lrに対するソウギ・カープの自然免疫、酸化ストレス耐性、および解毒機能を改善する[j]。^ a b c d e f g h『人事興信録』、2018年、498 - 594頁。
[21] xue s, chen s, ge y, et al。アンモニアに曝露された一般的なコイ(cyprinus carpio)の成長性能、生化学的パラメータ、非特異的免疫、および関連遺伝子に対するグルタチオンの調節[j]。^ a b c d e f g h『官報』第2222号、大正22年、546頁。
[22] xiao d, lin h r .ソマトスタチン阻害剤の1つであるシステアミンが若年のソウギソウ(ctenopharyngodon idellus)の血清成長ホルモン濃度および成長に及ぼす影響[j]。 比較生化学&生理パートa分子&^『人事興信録』第1版、人事興信録、2003年、134 - 93頁。
[23] feng guopan, wei kaijin, xu jin, et al。グルタチオンがザリガニの成長と高温ストレス耐性に及ぼす影響[j]。淡水水産、、2021年まで、51(4):95-100。
[24] wang yi, sun guoxiang, liu ying, et al。 ニジマスの成長と抗酸化作用に対する食餌性グルタチオンの影響[j]。大連海洋大学紀要,2017,32(6):651- 656。
[25]周婷。グルタチオンの成長性能と抗酸化機能への影響[d]。Master' s論文。2012年、早稲田大学農学部教授。
[26]禹柄宇(ヘリョン。心筋細胞におけるrosによる酸化ストレス損傷におけるzfp580の役割[d]。Master' s論文。石家荘:河北医科大学。2014年。
【27】劉舒蘭、故事少衛酸化ストレスの魚類モデルへの影響[j]。^『週刊ファミ通』2012年8月2日号、48-51頁。
[28] perricone c, carolis c d, perricone r .グルタチオン:自己免疫のキープレーヤー[j]。 ^『人事興信録』、2009年、8頁
(8): 697-701。
[29] jozefczak m, remans t, vangronsveld j, et al。グルタチオンは、金属誘起酸化ストレス防御において重要な役割を果たしている[j]。 ^「international journal of molecular sciences, 2012, 13(3): 3145-3175。
[30] li xiaomei, bao hoven-yue, wu lixin, et al。グルタチオンの減少がターボットの成長と抗酸化能力に及ぼす影響[j]。水生科学,2019,38(3):289-295。
[31] li guoming, sun yuping, wang guoxia, et al。幼体の海鳥の成長性能、血清生化学的指標および抗酸化能力に対する食事中のグルタチオンの影響[j]。日本動物学会誌,2019,31(7):3207-3217。
[32] ming j h, ye j y, zhang y x, et al。成長能力、非特異的免疫、抗酸化能力、および発現レベルに対する食事による減少したグルタチオンの影響[j]。 ソウギソウ(ctenopharyngodon idella)のigf-iとhsp70 mrnaの抗酸化能力と発現レベル[j]。^ a b c d e f g h『人事興信録』、2015年、438 - 439頁。
[33] thomas s, lowe j e, hadjivassilious v, et al。グルタチオンによるdna損傷における超酸化物の役割を調べるためのcometアッセイの利用[j]。1998年逃れRes BiophysいCom -門243(1):241-245。
[34] Sahoo p kさん、mukherjee s cの影響高食物α特定の免疫反応を起こすのでに-to-copherol吸入口通货记号への反抗要因や病気に抵抗できるれた健康とアフラトキシンB1−誘導免疫が欠乏したインド大財閥鲤Labeo rohita(ハミルトン)か[J]。^『寛政重修諸家譜』巻第3・5・9・7。
[35] shen c c, liang h j, wang c c, et al。酸化鉄ナノ粒子の抗原特異的t細胞サイトカイン発現に対する差動作用における細胞内グルタチオンの役割[j]。 ^『仙台市史』仙台市史編纂委員会編、仙台市史編纂委員会、2011年、6 - 9頁。
[36] zhou yanling, sun yuping, huang yanhua, et al。グルタチオン含有量に対する食餌性グルタチオンの影響,若年性pelteobagrus fulvidracoの免疫および抗酸化特性[j]。the journal of aquatic biology, 2018, 42(4): 728-735。
[37]梁春美。若年性oreochromis niloticus×o . aureusの成長および免疫機能に対する減少したグルタチオンの影響とその機構[d]。Master' s論文。2006年-華南農業大学教授。
[38]趙hongxia、tan yonggang、周孟。草鯉(ctenopharyngodon idellus)の成長、生理学的指標および耐病性に対する食餌性グルタチオンの影響[j]。中国の水生科学,2007(4):678-683。
[39] zhou yanling, sun yuping, cao junming, et al。幼体pelteobagrus fulvidracoにおける成長性能、体組成、血清生化学指標およびアンモニア窒素ストレスに対する耐性に対する食餌性グルタチオンの影響[j]。2017年(平成29年)4月1日:ダイヤ改正。
[40] el barbary mi, mohaned m h .ナイル川ti - lapia (oreochromis niloticus)におけるアフラトキシコシスに対するグルタチオンの化学予防および治療効果[j]。 グローバルVeterinaria、2014年、13(6):1111-1121人である。
[41] dong guifang, zhu xiaoming, yang yunxia, et al。pelteobagrus fulvidraco飼料へのグルタチオン添加による藻類毒素毒性の低減[j]。journal of aquatic biology, 2010, 34(4): 722—730。
[42] ren shengjie, zheng shuming, song yan, et al。グルタチオンのヘテロジガス性フナ(carassius auratus auratus)の成長およびphoximの解毒作用に対する影響[j]。^『仙台市史』通史編(通史編)、2016年、29 - 29頁。
[43] atli g、canli m .の金属曝露後の淡水魚oreochromis niloticusにおけるメタロチオニンおよび還元型グルタチオンの反応[j]。 環境毒性&^ a b c d e f g h i(2008)、33-38頁。
[44] peng min .グルタチオンによるcdの解毒機構[j]。東関理工学院,2014,21(5):69-73。