ギンセノシドの抽出方法は?

高麗人参(パナックス高麗人参c 。 a .マイヤー)アラリス科の多年草です。これは、気を浄化し、血液を生成する効果を持つ伝統的な貴重な中国医学であり、プラスを強化し、マイナスを払拭。銀塩辺は高麗人参の主な有効成分の一つで、高麗人参の総重量の約4%を占める。人間の免疫力を高め、アンチエイジング、抗疲労、心血管疾患治療などの効果があり、今ではいくつかの特効薬の主な成分になっています。抽出・分離技術は、抽出・濃縮を効率的に行うために不可欠ですginsenosides高麗人参と可能な限り多くの不純物を除去することにより、準備の浄化から。本稿では,報告されたギンセノシドの抽出・分離方法を概観し,ギンセノシドの抽出・分離の参考とすることを目的とする。

1ギンセノシドの抽出方法

1.1従来の抽出方法

1.1.1茹でる方法

煎じ薬は主に水を抽出溶媒として使用する。薬の材料を一定時間加熱して煮て煎じ薬にする。これは何度も繰り返す必要があり、主に漢方薬の水溶性成分を抽出するために使用されます。有効成分が水溶性で加熱に弱い医薬品に適しています。これは、漢方薬成分を抽出するための最も早く、最も一般的に使用される抽出方法の1つです。chen aliらはこの抽出速度を用いたギンセノシドrb1、re、rg1評価指標として直交試験法を用いて人参の煮沸抽出条件を最適化した。その結果、人参の8倍の質量を2回、1回につき1時間煮たところ、最も高い抽出速度が得られた[1]。

1.1.2なかった方法

マセレーション法とは、likeがlikeを溶解する原理に基づいて、薬効成分を室温または加熱条件下で溶媒に浸して抽出する方法です。zhang chunhongらは、抽出温度60°c、浸漬時間2時間、浸漬剤の10倍の溶媒体積でジンセノシドを抽出する浸漬法を用い、最大総サポニン収率8.33%を得た[2]。sun guangzhiらは、propanoyl ginsenosidesの抽出速度に対する溶媒の多重度、抽出時間、抽出回数、溶媒の体積分率の影響を調べ、最適な抽出プロセスを決定した[3]。

1.1.3逆流方法

還流法では抽出溶媒として有機溶媒を用いる。揮発性溶剤は、薬液を加熱して蒸留し、濃縮して抽出器に戻し、有効成分が完全に抽出されるまで抽出サイクルを継続します。現時点では、のための伝統的な還流操作実験室でジンセノシドを抽出する3時間(75±1)°cで80%メタノールで逆流し、4回繰り返すことです。yan guangjunらは、ginsenosiderg1とginsenoside reの合計含有量を指標とし、いくつかのプロセスを比較して総合的に分析した結果、逆流抽出プロセスが最も効果的であることを示した[4]。zhang lingらは、高麗人参の有効成分の含有量に対するさまざまな抽出プロセスの影響を研究し、逆流抽出に最適な抽出プロセス条件を決定した[5]。hao shaojunらは、ギンセノシドの含有量を評価指標とし、直交検定法を用いて最適抽出プロセスを最適化した[6]。kimらは、エタノール還流法の最適プロセスを最適化するための指標として、ジオール型とトリオール型サポニンの抽出を用いた[7]。

1.1.4 soxhlet抽出法

薬効成分をガーゼやろ紙に詰め、soxhlet抽出抽出容器に入れます。フラスコに抽出溶媒を一定量加え、加熱して沸騰させる。溶媒蒸気は凝縮して抽出容器に還流し、薬と接触します。その後、有効成分は溶媒中に溶解する。溶剤が一定量に達したら、有効成分を溶かした溶剤をフラスコに還流させる。溶剤を再加熱して蒸発させ、冷却した後、再び薬剤に接触させ、サイクルで抽出します。張京らが取った高麗人参の粉末2 gそして、60 mlのメタノールを添加した。soxhlet抽出器で8時間抽出したところ、高麗人参のサポニン含有量は3.27%であった[8]。woodらは、ギンセノシドを有効に抽出するために、80 ~ 90°cでソシュレット抽出法を用いた[9]。quらは、500 mgの米国人参サンプルをソックスレット抽出器に入れ、70%エタノールを含むギンセノシドを抽出した[10]。

1.2現代の抽出方法

1.2.1超臨界流体抽出

温度と圧力が物質の臨界点を超えた状態を超臨界流体といいます。超臨界流体は、液体に近い密度で、粘度が低く、拡散率が高いため、比較的溶解度が高く、迅速な物質移動による効率的な抽出が可能です。zhang leらは超臨界流体抽出法を用いたギンセノシドrh1とrh2を抽出する[11]。luoらは超音波補助超臨界流体抽出法を用いて、高収率のギンセノシドを得た[12]。woodらは、米人参からギンセノシドを超臨界流体抽出するための修飾剤としてメタノールとdmsoを用い、全サポニンの90%を抽出した[9]。wangらは、超臨界流体によって抽出されたギンセノシドの収率が、温度上昇に伴って上昇することを発見した[13]。

1.2.2泡分離法

泡分離法は、泡の表面にある物質の吸着特性の違いを利用して分離する技術です。から高麗人参サポニンは界面活性剤の性質を持つ撹拌時やガス注入時に安定した泡を発生させることができるため、浮選分離技術を用いて分離・濃縮することができます。秀らは、発泡分離法を用いて、rb1やrb2など5種類のサポニンを分離濃縮した[14]。zhang dajiaらは、フォーム分離を用いて、ギンセノシドrb1、rb2、rd、rc、rfを分離した[15]。wang yutangらは、動的泡浮選法を用いて人参エキス中のジオール型ギンセノイドを分離し、濃縮した[16]。zhangらは、泡の浮遊-固相抽出法を用いて、アメリカ人参の根から微量のサポニンを単離した[17]。

2・3位をUltrasonic-assisted抽出

超音波アシスト抽出法は、超音波で発生するキャビテーション、振動、破砕、攪拌の効果を複合的に応用し、効率的かつ迅速な抽出を実現するプロセスです。zhang崇希らは、従来の煎じ薬、温水浸漬、エタノール還流、マイクロ波抽出、超音波抽出などの方法を比較した結果、超音波抽出法が最も優れていることを示した[18]。zhang xianchenらは直交設計を用いて決定した異なる超音波処理下ginsenosidesの内容測色による条件、およびギンセノシドの超音波抽出プロセスの最適化[19]。wuらは、38.5 khzで水、メタノール、n-ブタノールを溶媒として超音波を用いた抽出が、従来の抽出に比べて3倍高速であることを発見した[20]。

1.2.4マイクロ波支援抽出技術

マイクロ波による抽出では、抽出システム内の溶媒をマイクロ波で加熱するため、抽出される植物試料中の有効成分が分離され、接触した溶媒中に入る。この技術は、主にマイクロ波加熱効果を利用して抽出と分離のプロセスを完了します。抽出された物質に吸収されたマイクロ波エネルギーは、セルの内部温度を急激に上昇させ、結果としてセルが破裂し、有効成分が溶媒中に溶解する。

kwonらはその条件を最適化したマイクロ波による人参サポニンの抽出応答曲面法を用いる[21]。shuらは、マイクロ波による抽出に対するマイクロ波強度、抽出時間、およびその他の要因の影響を調査した[22]。shiらはマイクロ波を用いた抽出法を用いて、高麗人参の根からrg1、re、rb1など7種類のギンセノシドを単離した[23]。wangらは、加圧されたマイクロ波を利用した抽出法を用いて、人参の根と米人参の試料を抽出し、抽出時間、圧力、溶媒が抽出収率に及ぼす影響を調べた[24]。shi weiらは、マイクロ波を利用した抽出技術を用いて、人参の根から6種類のギンセノイド(rg1、re、rb1、rc、rb2、およびrd)を迅速かつ効果的に抽出し分離した[25]。

1.2.5高圧及び超高圧抽出

高圧・超高圧(100 mpa以上)抽出は、抽出液と漢方薬を混合したものを静水圧で抽出します。植物細胞の内外の圧力が平衡に達すると、圧力が急速に解放され、細胞が浸透する。細胞内の有効成分は細胞のさまざまな膜を通って細胞外の抽出液に運ばれ、有効成分を抽出するという目的を達成する。超臨界抽出は、最短時間で最高の抽出効率を達成することができます。正常に操作すれば、純粋な抽出物が得られ、室温で抽出できるため、熱的に不安定な物質を分離することができる。

高圧・超臨界抽出が行われたギンセノシドの抽出に適用されます。chen ruizhanらは、超臨界抽出法を用いて、エタノール50%、圧力500 mpa、超高圧法による抽出時間2分という条件でギンセノシドを抽出した[26]。chenらは、超高圧でギンセノシドを室温で抽出し、均一設計法を用いて抽出条件を最適化した[27]。leeらは、高圧抽出条件と熱抽出条件で、全ジンセノシド代謝物とジンセノシド代謝物の収率を比較し、高圧抽出条件の方が収率が高いことを示した[28]。

1.3新しい方法

1.3.1生体模倣抽出法

生体模倣抽出法は薬物代謝の基本原理に基づいており、in vitroシミュレーションを用いているギンセノシドを抽出するための胃腸システム。陳新らは高麗人参の超微細粉末を原料にし、生体模倣溶剤と水を抽出溶媒にしたギンセノドを抽出した[29]。その結果、バイオミメティック抽出法による全ギンセノシド、ギンセノシドrg1、およびギンセノシドreの抽出効率は、水抽出法による抽出よりも高く、バイオミメティック抽出法によるクロマトグラムは、新たな成分の生成を示した。

1.3.2パルス電界抽出法

パルス電界抽出法は、食品工学分野で生体材料から有効成分を抽出するために応用されている新しい抽出法です。ホウらはパルス電気を使ったギンセノシドを抽出するフィールド抽出rg1, re, rb1, rc, rb2,また、高麗人参のrd法とホット流束抽出法およびマイクロ波を用いた抽出法を比較した。その結果、パルス電界抽出は最大の収率と最短時間を示した[30]。

1.3.3マトリックス固相分散抽出

固相分散抽出のプロセスは、まず、研磨剤分散剤でサンプルを混合し、その後、ガラスカラムに混合物をロードし、最後に、適切な溶媒で溶出して抽出する。shiらは固相分散抽出法を用いた高麗人参の葉の抽出、rb2、rc、rdなど8種のジンセノシドの抽出熱流束法と比較しましたその結果、固相分散抽出法の方が収率が高く、時間が短く、溶媒消費量が少ないことが示された[31]。

2分離方法

2.1 Solid-liquid分離

ギンセノシドは通常固液クロマトグラフィーを用いて分離される。サンプルは、メタノールまたはエタノールを用いて1 ~数回抽出され、抽出されたものを回収し、真空乾燥により組み合わせて抽出されます。水中に浮遊している残基は、n-ヘキサン層、酢酸エチル層、n-ブタノール層、水層などの異なる有機溶媒によって分割されます。n-ヘキサン層には高分子量の不純物と油可溶性不純物が含まれており、その他の分画は、傾斜溶媒系を用いた高分子樹脂カラムとシリカゲルカラム上のクロマトグラフィーによってさらに細かく分離しています。次に、通常相シリカゲルカラムクロマトグラフィー、逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー、ゲルカラムクロマトグラフィー、および異なる溶媒系を用いたグラジト溶出法によってさらに分割されます。分離した物質は分取液体クロマトグラフィーで精製し、化学的・分光的手法で構造を決定することができます。

2.2 Liquid-liquid分離

液液分割技術は、非混和性溶媒中のサンプルを分離するために、さまざまな分割比を利用します。強固な支持体が存在しないため、従来のカラムクロマトグラフィーでは定常相が試料に不可逆的に吸着するという問題がありません。液体-液体分割には、主に高速逆電流クロマトグラフィーと遠心分離クロマトグラフィーが含まれます。

2.2.1高速逆電流クロマトグラフィー(hsccc)

ギンセノシドの調製と分離には高速逆電流クロマトグラフィー(hsccc)が広く用いられている。hsccc分離の前に、高麗人参試料を有機試薬で抽出し、マクロポーラス樹脂カラム、逆相c-18カラム、中圧液体カラムクロマトグラフィーを経てサポニン分を濃縮濃縮します。hsccc条件の効果的な選択には、2相溶媒系の選択とサンプルの溶出方法が含まれます。移動相の選択は特に重要です。hscccを高麗人参製品中のギンセノシドの分離に応用すると、ギンセノシドrb1[32 - 34]、rg1[32, 34, 37]、re[32, 34, 37]、rf[33]、rd[33 - 34]、rg3[35]、rg5[35]、rk1[35]、f4[35]、ro[36]が分離された。

2.2.2遠心分離クロマトグラフィー(cpc)

遠心分離クロマトグラフィー(英:遠心分割chromatography, cpc)は、連続的な重力場で動作する液体-液体分離クロマトグラフィーである。現在、cpcではクロロホルム-メタン-水の溶媒系を用いてサポニンの分離に成功している。wangらはcpcを使って分離したginsenosides rc, rb1, re酢酸エチル-n-ブタノール-水(1:1:2)溶媒系を使用したアメリカ人参から[38]。

2.3新しい方法

2.3.1活性炭選択的吸着

kuangらは、活性炭の選択的吸着を用いて分離した高麗人参のつぼみから銀塩のreを精製する[39]。

2.3.2復調技術

の高麗人参の成分と機能通常、「分離-バイオアッセイ」または「バイオアッセイ誘導分離」のいずれかの方法で研究されています。抽出された成分が生物学的に活性であるかどうかを証明するためには、成分を含まない抽出物をdemodified抽出物として調製する必要があります。生物活性を比較する過程で、demodifiedエキスの生物活性が元のエキスよりも低い場合は、その成分が生物活性物質であることを意味します。そのため、ケミカルクロマトグラフィーや免疫親和性クロマトグラフィーなどの方法が研究の対象となっている。

2.3.2.1化学クロマトグラフ

一部のdemulcent抽出物はカラムクロマトグラフィーによって調製することができる。例えば、rb1 demulcentエキスを調製するためには、まず、水と水性エタノールを溶離液として用いて、高麗人参の花芽エキスを高分子性樹脂の柱を通して分離する。次に、水性エタノール流を逆相高性能液体クロマトグラフィーによって分離します。分離は3つの部分に分けることができます:水の部分、rb1とサポニンの部分ですrb1部分が除去され、残りの水部分と他のサポニン部分が結合してrb1脱髄抽出物が形成される。効率を向上させるため、liuらはオンライン制御クロマトグラフィー技術を発明し、回収液を調製した[40]。

2.3.2.2 Immunoadsorbentクロマトグラフ

免疫吸着クロマトグラフィー(immunoadsorbent chromatography)は、静止相を標的化合物に対するモノクローナル抗体とするクロマトグラフィー法である。複雑な混合物から微量成分を分離し濃縮するための効果的な方法です。標的化合物に対する免疫親和性クロマトグラフィーの高い選択性は、静止相に架橋されたタンパク質に由来する。田中らはモノクローナルを用意しているギンセノシドrb1[41-43]、rg1[44]、rd[45]、re[46]に対する抗体.

化学クロマトグラフィー法で抽出物を調製する場合と比較して、免疫親和性クロマトグラフィー法では、分析の選択性が向上し、サンプル前処理の工程が削減され、サンプルキャリアの体積が増加します。一方で、クロマトグラフィー分離に要する時間や最適な実験条件の選択に要する時間を大幅に短縮することができます。しかし、モノクローナル抗体製造プロセスが複雑であることや、イムノアフィニティカラムが不安定であることなどの欠点がありました。

3展望

従来の抽出・分離法(煎り、逆流など)にはそれぞれ長所があるものの、抽出時間が長く、効率が低く、溶媒消費量が多いなどの制約があり、熱安定性や揮発性成分の抽出には向いていませんでした。したがって、人々はより効率的で便利な方法を探していました。伝統的な中国医学の抽出技術の継続的な発展に伴い、抽出に適した新しい方法とギンセノシドの分離は常に出現している。抽出時間が短く、有機溶剤の使用量が少なく、抽出物の選択性が高く、環境汚染が少ないという利点があります。これは、銀セノシドのさらなる開発と有効利用の基盤となるものであり、銀セノシドの抽出・分離および更なる開発・利用は、今後の展望が広がるものと考えられます。

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